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14．抗氧化作用 實驗用無細胞的自由基（O2?）產生系統及佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯（PMA）刺激的多形核白細胞為模型，用化學發光方法及自旋捕捉技術研究了丹參對超氧陰離子的清除作用。結果表明，丹參不論對黃嘌嶺氧化酶-黃嘌嶺系統產生的O2?及PMA刺激白細胞所產生的O2?的清除作用優于超氧化物歧化酶。采用改良的鄰苯三酚自氧化法和TBA比色法測定結果，丹參注射液10g／kg能明顯提高老齡小鼠紅細胞、心、肝、腎中SOD活性，在同一老齡小鼠中也相應的顯著降低血清、心、肝、腎中過氧化脂質（LPO）含量。犬肢體缺血4小時有明顯再灌注損傷，靜注丹參有抑制自由基反應，減少脂質過氧化物生成作用，其機制可能是丹參通過ATP分解，增加ATP合成，從而減少離子泵障礙，加之Ca2+拮抗劑作用阻止Ca2十入細胞內，阻止黃嘌嶺脫氫酶向黃嘌呤氧化酶Υ轉變，從而減少自由基產生，同時也減少胞漿Ca2十超負荷，另外丹參可能還有與維生E類相似的自由基清除劑作用，從而減少肢體缺血再灌注損傷。采用黃嘌嶺一黃嘌呤氧化酶一魯米諾化學發光體系，用化學發光測量儀測定發光強度，以檢測藥物的抗自由基效果，結果發現丹參酮IIA磺酸鈉LD50（藥物抑制發光強度50魄的濃度）為1.90pg／ml。 15．抗菌作用 體外抑菌試驗，總丹參酮對金黃色葡萄球菌和其耐藥菌株有較強的抑菌作用。總丹參酮有10個單體成分，分別進行抑菌試驗，只有隱丹參酮、二氫丹參酮A、羥基丹參酮、丹參酮Ⅱ-B和丹參酸甲酷有抑菌作用。總丹參酮及其單體對人型結核菌H37Rv均有不同程度的抑菌效果，以丹參新醌甲的效果最強。總丹參酮對真菌鐵銹色毛發癬菌和紅色毛發癬菌也有抑制作用。 16．促進骨折愈合 用45Ca液閃測定，觀察正常小鼠股骨及脛骨45Ca沉積的情況及丹參對小鼠右股骨中段骨圻后45Ca沉積的影響，發現正常小鼠，左右骨相應部位鈣沉積相似；右股骨中段骨折后，灌服丹參組小鼠的中段股骨鈣沉積不斷升高，而股骨上、下兩段反而下降，說明丹參可以從鄰近骨組織中調動更多的鈣，以更好地滿足新骨形成對鈣的需要，從而使骨折愈合加速。給實驗性骨折家兔肌注丹參注射液，制石蠟標本，染色后作可見光和偏振光觀察，發現在炎癥反應階段丹參使擴張充血的毛細血管提前出現；在清掃階段，丹參紐血腫內含鐵血黃素較對照組提前出現；在細胞活動及纖維骨性骨痂、原始骨性骨痂、繼發骨性骨痂的出現時間方面，丹參組均比對照組提前，提示經丹參作用后，骨折的愈合各階段均比對照組提前，從而促進了骨折的愈合。采用原子吸收光譜法觀察，在大氏脛骨閉合性骨折早期愈合過程中發現丹參促進骨折愈合的作用與其提高血清鋅含量、加強骨折斷端鄰近骨組織中鋅的動員，以及通過提高骨痂中鋅含量、鋅／銅比值來加速骨痂組織生長和鈣化過程有關。實盞用雞胚額骨分離細胞體外培養結合組織化學技術觀客，發現0.2％丹參Eagle培養液能明顯促進成骨細胞樣細胞的分裂和增殖；促進其成熟，分泌膠原物質和堿性磷酸酶（ALP），并使鈣鹽在膠原基質上沉積，形成骨小結節以及骨組織形成，由于成骨細胞是骨折修復中逞拴常重要作用的細胞，因而應用丹參治療可以通過七1找骨細胞數量而對骨折修復產生有利的影響。 l7．對皮膚傷口愈合的作用 在免前肢的中、下1／3部位作一長1.5cm的縱行切口，術后不同時間在切口處取皮膚作組織學檢查，以觀察丹參對皮膚愈合成作用，其機制可能是丹參通過ATP分解，增加ATP合成，從而減少離子泵障礙，加之Ca2+拮抗劑作用阻止Ca2十入細胞內，阻止黃嘌嶺脫氫酶向黃嘌呤氧化酶Υ轉變，從而減少自由基產生，同時也減少胞漿Ca2十超負荷，另外丹參可能還有與維生E類相似的自由基清除劑作用，從而減少肢體缺血再灌注損傷。采用黃嘌嶺一黃嘌呤氧化酶一魯米諾化學發光體系，用化學發光測量儀測定發光強度，以檢測藥物的抗自由基效果，結果發現丹參酮IIA磺酸鈉LD50（藥物抑制發光強度50魄的濃度）為1.90pg／ml。 18．性激素樣作用 用子宮重量法及陰道涂片法實驗，2％總丹參酮淀粉懸液每只0.2ml給小鼠灌胃，每日1～2次，連用3日，證明丹參酮有較溫和的雌激素樣活性，2％丹參酮淀粉懸液每只1ml灌胃，每日2次，連續給藥5日，結果證明丹參酮對去睪丸大鼠再給予丙酸睪丸酮呈明顯的對抗作用，因此，丹參酮除具有雌激素樣活性外還具有抗雄性激素樣活性。 19．體內過程 小鼠灌服隱丹參酮后，其在胃腸道的半衰期為3.5小時。隱丹參酮注入離體腸管，在生理鹽水中保溫，測出回收率為98％，證明隱丹參酮可以從胃腸道中吸收。體內的分布以肝和肺為最多，腦和心次之；脾、血漿及腎依次遞減。若靜脈內給藥，隱丹參酮的分布在腦、肺和心較高；依次為肝、血漿、腎及脾。該藥在腦組織的含量較高，可能由于隱丹參酮的脂溶性大，較易透過血腦屏障。大鼠灌服隱丹參酮后，以原形藥自尿中排出很少，24小時僅排出給藥量的0.21％；48小時內共排出0．34％。收集的尿，經大孔樹脂柱層析，先后用水和20%、50％、70％和95％乙醇洗脫，洗脫液濃縮后作抑菌試驗，其中50％、70%和95%乙醇部有抑菌作用。收集20小時內膽汁，測出原形藥為給藥量的0.8％。從膽汁中亦可分到與尿中＇相同的7個代謝物：7號為丹參酮IIA；6號為原形藥隱丹參酮，5號和4號均含有醌鍵和醚鏈，與丹參酮IIA相似，可能為丹參酮IIA不同部位的羥基化產物，極性增大；3號與隱丹參酮結構相近，但極性較大；2號和1號極性更大，推測是丹參酮IIA與谷氨酸的縮合物，谷氨酸可能在丹參酮ⅡA的呋喃環甲基部位以酰氨基與后者結合。以上代謝物中2，3，5和6號有抑制金黃色葡萄球菌的作用，但仍以原形為主。從大鼠十二指腸內注入隱丹參酮，也證明膽汁中的代謝產物有丹參酮］Ia，是經肝內脫氫轉化而成。若隱丹參酮與大鼠肝勻漿在37℃保溫2小時，然后分離提取，經鑒定有隱丹參酮外，尚有丹參酮IIA如二氫丹參酮Ⅰ與肝勻漿保溫，也可檢出丹參酮Ⅰ，但量較少。麻醉大鼠，由十二指腸內注入總丹參酮，收集膽汁，經氯仿提取，高效液相分離，其膽汁中丹參酮IIA量較給丹參酮ⅡA組高出5～10倍以上，提示總丹參酮中的隱丹參酮有部分轉化為丹參酮Πα。給丹參酮A組的動物膽汁中，排出的丹參A較丹參酮II a及隱丹參酮略有增多。小鼠分別給予丹參酮A，丹參酮ⅡA及隱丹參酮，不同時間收集血、尿、膽汁及取肝組織，檢測各樣品抑制分枝桿菌607的抑菌物質，結果顯示在給藥后2小時，各組動物均無抑菌物質；給藥4小時后，小鼠的肝和膽汁內有抑菌物質出現，以隱丹參酮組的抑菌作用最強；此抑菌物質在肝內停留時間較長，給藥后30小時仍可由肝內檢出。用［35S］標記丹參酮 IIA磺酸鈉，給小鼠1次靜注后1.6和24小時，組織中的放射性以肝、肺和腸為最高；腎、脾、心和胃次之；腦最低。隨著停藥時間的延長放射性亦逐漸趨于減少。在給藥后6小時，膽囊及其內容物的放射性為注入量的12.7％。若每日靜注1次35S丹參酮ⅡA磺酸鈉，共3日，各組織中的放射性較單次注射稍有增加，但累積量不多。單次給藥后24小時，自尿和糞中排出的放射性分別注入量的10.2％和32％；72小時內尿中排出16.5％，糞中排出75.7%。將收集的尿液用甲醇提取，經放射性薄層色譜及自顯影證明，從尿中排出的代謝物，上個為原形藥，另一個為基本骨架與原形藥相似，增加了某些極性基團的代謝物。用3H標記的丹參酮 II A磺酸鈉，給大鼠靜注，注后2小時的血和組織中放射活性均達峰值，組織中的分布以肝為最高；脾、腎、肺、腸、心、胃、脊髓和腦依次遞減。自膽汁排出的放射性亦以給藥后2小時為最高，12小時內的排出量為注入量的一半。給藥后2小時自尿中排出的放射性為10.2％，72小時為18.2％；糞中的排出量在給藥后6小時為9.2％，72小時為75.2％，所以此藥主要從糞中排泄。從膽汁、尿和糞中提取物經薄層色譜鑒定，除在大量原形藥外，另有2個放射性濃集點，其R；值分別為0.25和0.37。［35S］丹參酮ⅡA磺酸鈉注入大鼠后，組織中的分布和排泄與3H標記的丹參酮ⅡA磺酸鈉相似，但尿中代謝物除原形藥外只有1個代謝物帶有磺酸基團，其R；值為0.25。此外，丹參水溶性成分3，4-二羥苯基乳酸（DH PLA）家免靜注后的藥代動力學為一室模型，其消除速率常數為0.0466±0.014／min，生物半衰期為16.5±5.77分鐘。大鼠在給予丹參期間，同時給華法林，后者的吸收率（Ka）、分布容積（Vd）和消除半衰期（T1/2）均明顯減少而峰值血濃度（Cmax）及達到峰值濃度所需時間（Tmax）卻顯著增加。20．毒性 丹參煎劑給小鼠腹腔注射，48小時內，43g／kg組未見動物死亡，而64g／kg組10只動物死亡2只。丹參水提乙醇溶解部分，小鼠一次腹腔注射的LDso為80.5±3.1g（生藥）／Kg。小鼠腹腔注射丹參注射液的LDso為36.7±3.8g（生藥）／kg；家兔每日腹腔注射丹參注射液2.4g／kg，連續14日，未見毒性反應，血象、肝腎功能和體重均無異常改變，實質性臟器除明顯充血外，亦未見特殊變化。小鼠每日灌胃2%丹參酮混懸液0.5ml，連續14日，大鼠每日灌胃2.5ml，連續10日，也未見毒性反應。 (責任編輯：Doctor001) |
